關于湘智
About Us用離心機提取乳酸脫氫酶及輔酶
更新時間：2012-08-23 點擊次數(shù)：2050次
臺式離心機可以應用于乳酸脫氫酶及輔酶的提取。乳酸脫氫酶，是一種不需氧脫氫酶，以輔酶I（NAD﹢）為輔酶，催化乳酸與丙酮酸的可逆的氧化還原反應。肌肉中含有大量的乳酸脫氫酶，在乳酸含量較高及氧氣充足情況下，催化乳酸生成丙酮酸，體外實驗中，為觀察方便，在隔絕空氣后以甲烯藍作為受氫體，井用固定反應中生成的丙酮酸，而使乳酸全部轉化為丙酮酸。今天我們對如何通過臺式離心機提取乳酸脫氫酶及輔酶I進行介紹。
通過離心提取乳酸脫氫酶及輔酶用到的材料、試劑及設備有：（1）動物后腿肌肉;（2）9g/LNaCl溶液;（3）活性炭;（4）10g/L乳酸鋰溶液;（5）5g/LKCN溶液;（6）乳缽;（7）臺式離心機等
具體操作方法：
1．輔酶I（NAD﹢）的制備：取動物后腿肌肉2g置沸水浴中煮沸4—5分鐘（抑制酶的活力，防止將輔酶I破壞），取出冷卻、剪碎，加入少許9g/LNaCl溶液及細沙用乳缽研磨成糊狀，再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，利用臺式離心機進行離心沉淀，收集上清液，儲冰箱備用。
2．乳酸脫氫酶酶蛋白的提取：取動物后腿肌肉2g置乳缽中，加入少許9g/LNaCl溶液及細砂，仔細研磨后再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，用雙層紗布過濾，濾液加活性炭0.5g振搖數(shù)分鐘后放置半小時，并時常搖動，然后通過臺式離心機離心分離，取上清液備用。
來源：高速離心機
通過離心提取乳酸脫氫酶及輔酶用到的材料、試劑及設備有：（1）動物后腿肌肉;（2）9g/LNaCl溶液;（3）活性炭;（4）10g/L乳酸鋰溶液;（5）5g/LKCN溶液;（6）乳缽;（7）臺式離心機等
具體操作方法：
1．輔酶I（NAD﹢）的制備：取動物后腿肌肉2g置沸水浴中煮沸4—5分鐘（抑制酶的活力，防止將輔酶I破壞），取出冷卻、剪碎，加入少許9g/LNaCl溶液及細沙用乳缽研磨成糊狀，再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，利用臺式離心機進行離心沉淀，收集上清液，儲冰箱備用。
2．乳酸脫氫酶酶蛋白的提取：取動物后腿肌肉2g置乳缽中，加入少許9g/LNaCl溶液及細砂，仔細研磨后再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，用雙層紗布過濾，濾液加活性炭0.5g振搖數(shù)分鐘后放置半小時，并時常搖動，然后通過臺式離心機離心分離，取上清液備用。
來源：高速離心機
